Etapas específicas para extração de clorofila por meio da fragmentação celular usando um triturador de células ultrassônico

O triturador de células ultrassônico utiliza o efeito de dispersão do ultrassom em líquido para criar cavitação, quebrando assim partículas sólidas ou tecidos celulares no líquido.
O desenvolvimento da indústria biológica aumentou os requisitos para experimentos usando pulverizadores de células ultrassônicas, como medir e controlar a temperatura da amostra, melhorar o nível de inteligência de amostras de resfriamento de baixa temperatura e de toda a máquina, e assim por diante.
As etapas específicas para extrair clorofila por meio de esmagamento de células ultrassônicas usando um triturador de células ultrassônico:
1. Centrifugue ou filtre a amostra de água e instale uma membrana filtrante de fibra de acetato no filtro de sucção. Despeje um volume quantitativo de amostra de água para filtração, e a pressão negativa durante a filtração não deve ser muito alta (cerca de 50kPa). Depois que a amostra de água for coletada, continue a coletar por 1-2 minutos para reduzir a umidade na membrana do filtro. Se for necessário armazenamento de curto prazo por 1-2 dias, ele pode ser armazenado em uma geladeira comum para congelamento. Se for necessário armazenamento de longo prazo (30 dias), deve ser armazenado em geladeira de baixa temperatura (-20 graus).
2. Retire a membrana filtrante que contém o fitoplâncton e seque-a em baixa temperatura na geladeira por 6-8 horas. Corte em pequenos pedaços com uma tesoura e coloque em um tubo de centrífuga de 5ml ou 10ml. Adicione 3-4 ml de acetona 90% para mergulhar os fragmentos abaixo do nível do líquido. Coloque os fragmentos em um recipiente ultrassônico e use ondas ultrassônicas para quebrar as células da amostra. (Comparando experimentos em diferentes tempos e frequências para facilitar a identificação de * tempo e frequência de fragmentação para métodos unificados).
3. Centrifugue a amostra submetida à fragmentação celular usando ultrassom usando uma centrífuga (3000-4000r/min) por 10 minutos. Despeje o sobrenadante em um balão volumétrico de 5ml ou 10ml. Diluir para 5ml ou 10ml com acetona 90% e agitar bem.
4. Coloque o sobrenadante num espectrofotómetro e utilize uma placa colorimétrica de percurso óptico de 1 cm para ler os valores de absorvância nos comprimentos de onda de 750 nm, 663 nm, 645 nm e 630 nm, respectivamente. Use acetona a 90% como medição de absorvância em branco para corrigir a absorvância da amostra.